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產(chǎn)品中心

Product Center

PT-K75細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

細(xì)胞接受后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將15ml離心管置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)離心棄去15ml離心管中的培養(yǎng)基,細(xì)胞沉淀用新鮮的*培養(yǎng)基重懸并培養(yǎng)。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。

產(chǎn)品型號(hào):
更新時(shí)間:2025-05-26
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問(wèn)量:7664
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品牌其他品牌規(guī)格T25方瓶
供貨周期現(xiàn)貨
    1.  

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

  1. 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
  2. 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
  3. 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
    • 細(xì)胞處理:
  4. 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
  5. 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
  6.  

1.      將培養(yǎng)瓶中細(xì)胞輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液。

2.      根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),按1:2或以上比例用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,將合適量培養(yǎng)液移入到T-25培養(yǎng)瓶中或T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。

 

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